旭晨教育考博頻道為廣大考生整理了考博資料,供大家參考學習。本文主要內容是考博生物化學與分子生物學重點十:氨基酸順序分析。
氨基酸順序分析
蛋白質多肽鏈的氨基酸順序分析,即蛋白質一級結構的測定,主要有以下幾個步驟:
1. 分離純化蛋白質,得到一定量的蛋白質純品;
2. 取一定量的樣品進行完全水解,再測定蛋白質的氨基酸組成;
3. 分析蛋白質的N-端和C-端氨基酸;
4. 采用特異性的酶(如胰凝乳蛋白酶)或化學試劑(如溴化氰)將蛋白質處理為若干條肽段; 5. 分離純化單一肽段;
6. 測定各條肽段的氨基酸順序。一般采用Edman降解法,用異硫氰酸苯酯進行反應,將氨基酸降解后,逐一進行測定;
7. 至少用兩種不同的方法處理蛋白質,分別得到其肽段的氨基酸順序;
8. 將兩套不同肽段的氨基酸順序進行比較,以獲得完整的蛋白質分子的氨基酸順序。
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